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2022年初中生物雙縮脲試劑檢測蛋白質原理

來源:網絡資源 2022-04-29 21:56:59

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雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在堿性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時,試液中的銅與多肽配位,絡合物呈紫色。可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/mL。

1雙縮脲試劑檢測蛋白質評價

優點:雙縮脲法測定蛋白質的測定范圍是1~10mg蛋白質,操作簡單、快捷。既適合手工操作,又適合自動化分析,重復性好、線性關系好, 雙縮脲試劑可以長期保存( 若貯存瓶中有黑色沉淀出現,則需要重新配制)。

缺點:靈敏度差,測定范圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質產生顏色的深淺相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精確的蛋白質測定。干擾測定的物質包括有:在性質上是氨基酸或肽的緩沖液,如TrIs緩沖液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉淀。

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